西安cck-8细胞增殖的方法

时间:2020年06月20日 来源:

抗体稀释参考

一抗稀释范围为1mg/mL原液1:1000-1:5000或0.2-1.0µg/mL,二抗稀释范围为1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL


  注意事项 


1. 为获得比较好效果,在孵育步骤请使用摇床;

  2. 将Tween20(终浓度0.05-0.1%)加入封闭缓冲液和稀释的抗体溶液,以降低非特异信号;

  3. 不要使用叠氮钠作为缓冲液的防腐剂,叠氨钠是HRP的***物;

  4. 避免手与膜直接接触,实验过程应戴手套或使用干净的镊子;

  5. 所有设备必须清洁且不沾染外来物质,金属器械(如剪刀)不得具有可见的锈迹,锈迹可能导致斑点形成和高背景。


细胞增殖做的比较牛的公司。西安cck-8细胞增殖的方法

内参抗体

β-actin HRP Mouse mAb

1.产品简介

     β-actin是6种肌动蛋白之一,存在于许多物种的细胞中,其免疫学和生理功能非常相似。因此,β-actin可用于Western Blot的内参对照。需要注意的是,在某些细胞中β-actin的表达并不稳定。例如在脂肪组织中,β-actin的表达非常低,因而不能作为这些组织的内参对照。

2.产品特点

▪用于WB实验,性价比高,推荐稀释比例为:1:1000 - 1:10000

▪常备现货

β-actin Mouse mAb

1.产品简介

     β-actin是6种肌动蛋白之一,存在于许多物种的细胞中,其免疫学和生理功能非常相似。因此,β-actin可用于Western Blot的内参对照。需要注意的是,在某些细胞中β-actin的表达并不稳定。例如在脂肪组织中,β-actin的表达非常低,因而不能作为这些组织的内参对照。

2.产品特点

▪性价比高,多种稀释比例推荐:

WB: 1:1000 - 1:10000

IHC: 1:200

▪常备现货

苏州brdu细胞增殖试剂盒CCK试剂盒为1瓶溶液,毋需预制,即开即用.

    上海儒安生物科技有限公司CCK8检测细胞增殖/毒性的原理CellCountingKit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓***二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazandye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。用途:***筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、**药敏试验CCK8的优点:使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂;CCK-8法能快速检测;CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度;CCK-8法的重复性优于MTT法;CCK-8法对细胞毒性小;CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。CCK8的缺点:与MTT法相比,CCK8和XTT的价格比较贵。CCK8试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,不注意的话容易产生漏加或多加。与以往的增殖/毒性测定试剂相比较:检测方法MTT法XTT法WST-1法CCK8法甲臢产物的水溶性差。

内参抗体

β-Tubulin Mouse mAb


1.产品简介

     微管蛋白是有丝分裂器、纤毛、鞭毛和细胞骨架的组成部分,主要由2种可溶性蛋白组成,α-tubulin和β-tubulin,分子量均约为55 kDa。β-tubulin抗体可作为Western Blot中的内参对照。但要注意的是,β-tubulin在某些细胞中的表达可能也不稳定。例如在脂肪组织中β-tubulin的表达量非常低,因此对于这些组织就不能用β-tubulin作为内参对照。

2.产品特点

▪性价比高,多种稀释比例推荐:

WB: 1:1000 - 1:10000

IF:  1:200 - 1:1000

IHC: 1:200 - 1:1000

▪常备现货

3.结果示例

 β-tubulin小鼠单抗(3G7)经1:5000(泳道1)、1:10000(泳道2)、1:20000(泳道3)

和1:40000 (泳道4)梯度稀释,对Hela细胞裂解物进行Western Blot分析。

 β-tubulin小鼠单抗(3G7)对人宫颈*(左)和前列腺病(右)患者的扁平细胞病变进行免疫组化染色。


细胞增殖具体是指什么?

Cell Counting Kit-8 (CCK-8)


我们的产品Cell Counting Kit-8(CCK-8)相比以前的方法为细胞数测定和细胞增殖/毒性检测提供了更方便和灵敏的方法。试剂盒使用了一种高水溶性的四唑盐,WST-8,它在电子耦合试剂存在下还原产生水溶性formazan形式的染料。由脱氢酶产生的formazan的量与活细胞的数量呈直接的线性关系。CCK-8的检测灵敏度高于其他方法,如MTT,XTT,MTS或WST-1等。


Q:每个孔需要接种的细胞数量是多少?

A:对于贴壁细胞,每孔至少需要1000个细胞(100 μl培养基)。对于白细胞,由于灵敏度较低,每孔至少需要2500个细胞(100 μl培养基)。推荐的96孔板每孔比较大细胞数为25000。如果使用24孔或6孔板进行该检测,请计算相应的每孔的细胞数,并调整CCK-8的体积,使其为每孔总液体体积的10%。



细胞增殖的研发途径。长沙cck8细胞增殖实验

CCK用途:试剂筛选、细胞增殖测定等。西安cck-8细胞增殖的方法

细胞增殖间期

S期DNA合成期

从G1末期到S初期、细胞内迅速形成DNA聚合酶及四种脱氧核苷酸。S期主要特点是利用G1期准备的物质条件完成DNA复制,并合成一定数量的组蛋白,供DNA形成染色体初级结构。在S期末,细胞核DNA含量增加一倍,为细胞进行分裂作了准备。DNA复制一旦受到障碍或发生错误,就会阻挡细胞的分裂或引起变异,导致异常细胞或畸形的发生。S期持续时间大约7~8小时。G2期DNA合成后期

这一时期的主要特点是为细胞分裂准备物质条件。DNA合成终止,但RNA和蛋白质合成又复旺盛,主要是组蛋白、微管蛋白、膜蛋白等的合成,为纺锤体和新细胞膜等的形成备足原料。若阻断这些合成,细胞便不能进入有丝分裂。G2期历时较短而恒定,哺乳动物细胞一般为1~1.5小时。 西安cck-8细胞增殖的方法

上海儒安生物科技有限公司位于上海市,注册资本100-200万元,旗下拥有11~50人***专业的员工。专业的团队大多数员工都有多年工作经验,熟悉行业专业知识技能,致力于发展上海儒安生物的品牌。我公司拥有强大的技术实力,多年来一直专注于从事生物技术、物联网技术、网络技术领域内的技术开发、技术咨询、技术转让、技术服务,软件开发,电子商务(不得从事增值电信、金融业务),化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品)、实验窒设备的销售。的发展和创新,打造高指标产品和服务。自公司成立以来,一直秉承“以质量求生存,以信誉求发展”的经营理念,始终坚持以客户的需求和满意为**,为客户提供质量的[ "细胞转染试剂", "ecl发光液", "cck8细胞增殖", "内参抗体" ],从而使公司不断发展壮大。

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